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Item#:
cAP-0010
| Size | Price |
|---|---|
| 1.0 Frozen Vial | $600.00 |
| 訂單信息 | |
| 產(chǎn)品名稱 | 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞（HRMVEC） |
| 目錄號 | cAP-0010 |
| 產(chǎn)品格式 | 冷凍瓶 |
| 細胞數(shù)量 | > 5x10 [5]個細胞/小瓶 |
| 一般信息HRMVEC（cAP-0010）細胞是從正常人視網(wǎng)膜組織中分離出來的。將細胞裝在冷凍小瓶中（第3代提供細胞）。推薦使用內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基（EGM，包含10％的血清和生長補充劑，cAP-02）進行細胞培養(yǎng)，按照以下詳細方案進行培養(yǎng)時，這些細胞的小平均群體倍增水平> 20。 | |
| 細胞的表征 | |
| 1. | 細胞質(zhì)VWF /因子VIII免疫熒光陽性> 95％ |
| 2. | 免疫熒光檢測Di-I-Ac-LDL細胞質(zhì)攝取> 95％陽性 |
| 3. | 細胞質(zhì)PECAM1免疫熒光陽性> 95％ |
| 4. | HRMVEC對HIV-1，HBV，HCV和支原體呈陰性 |
| 產(chǎn)品使用情況單元僅供研究使用。 | |
| 用干冰包裝運輸冷凍瓶。 | |
| 到達細胞的處理當您收到裝有冷凍小瓶中的細胞的干冰包裝時，請將冷凍小瓶中的細胞轉(zhuǎn)移到-80C冷凍室中進行短期保存，或者將其移入液氮罐中進行長期保存。 | |
| 解凍細胞和亞培養(yǎng)的協(xié)議 | |
| a） | T25燒瓶的預涂-將2ml快速涂層溶液（cAP-01）加入T25燒瓶中，以覆蓋燒瓶的整個表面，5分鐘后，通過抽吸處理過量的涂層溶液，準備使用燒瓶（盡管可以使用包含其他細胞外基質(zhì)（即明膠，膠原蛋白和纖連蛋白）的溶液，但請確保事先優(yōu)化條件）。 |
| B） | 首先在37°C水浴中解凍冷凍的細胞瓶，然后將細胞轉(zhuǎn)移到裝有10ml cAP-02培養(yǎng)基的預涂T25燒瓶中，細胞通常會匯合過夜，并準備進行傳代。 |
| C） | 要傳代細胞，請在T25燒瓶中用5ml HBSS（RT）沖洗兩次。然后將2ml胰蛋白酶/ EDTA（RT）（cAP-23）加入一個T25燒瓶中；吸出后在20秒內(nèi)輕輕處置過量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。 |
| D） | 將T25燒瓶中的細胞在室溫或37°C下放置1分鐘（大多數(shù)細胞通常會在1-2分鐘內(nèi)從表面分離；或在顯微鏡下監(jiān)控細胞，直到大多數(shù)細胞被聚集起來，然后輕輕敲擊燒瓶）靠在工作臺表面上，在顯微鏡下監(jiān)控時，細胞會在燒瓶表面上移動。 |
| E） | 加入5ml胰蛋白酶中和緩沖液，并通過800g離心5分鐘使細胞旋轉(zhuǎn)。 |
| G） | 用10或15ml cAP-2培養(yǎng)基重懸細胞沉淀，然后將5 ml分別轉(zhuǎn)移到2或3個預涂的T25燒瓶中（對于1/2至1/3的繼代培養(yǎng)比例）。 |
| H） | 每2或3天更換培養(yǎng)基，通常在7天內(nèi)（當以1/3的比例分裂時）融合細胞。 |
| I） | 要準備靜態(tài)細胞，當細胞幾乎匯合時，請在實驗前約8-12小時用含有0.5％FBS的內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基（EBM，cAP-03）代替cAP-02。 |
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