Favorgen  FABGK000-Maxi說明書

Favorgen位于中國(guó)臺(tái)灣國(guó)家生物技術(shù)園區(qū)。它通過自動(dòng)化系統(tǒng)建立了ISO合格工廠，
生產(chǎn)高質(zhì)量的分子生物學(xué)產(chǎn)品和臨床化學(xué)試劑。目前，F(xiàn)avorgen在美國(guó)，中國(guó)，韓國(guó)和丹麥設(shè)立分支機(jī)構(gòu)，并在30多個(gè)國(guó)家設(shè)立了分銷網(wǎng)絡(luò)。自成立以來，F(xiàn)avorgen已經(jīng)在其先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)施上投入了大量資金，以競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。Favorgen致力于通過與學(xué)術(shù)和行業(yè)合作伙伴的內(nèi)部和合作開展研究，以不斷提供高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。

Nucleic-acids extraction Genomic DNA Extraction

核酸提取基因組DNA提取

Favorgen  FABGK000-Maxi說明書

FavorPrepTM Blood / Cultured Cell Genomic DNA Extraction Maxi Kit

(For Research Use Only)

Cat. No.

/ preps

FABGK000-Maxi

(2 preps)

FABGK003

(10 preps)

FABGK003-1

(24 preps)

Proteinase K powder+ 11 mg x 2 11 mg x 10 11 mg x 24

FABG Buffer 22 ml 110 ml 265 ml

W1 Buffer* (concentrated) 6.5 ml 33 ml 88 ml

Wash Buffer** (concentrated) 3 ml 20 ml 40 ml

Elution Buffer 6 ml 30 ml 60 ml

FABG Maxi Column 2 pcs 10 pcs 24 pcs

Elution Tube (50 ml tube) 2 pcs 10 pcs 24 pcs

User Manual 1 1 1

Preparation of ProteinaseK solution (20mg/ml) and Wash Buffer for first use:

規(guī)格:

原理：自旋柱(硅膠膜)

樣本大小：新鮮/冷凍血液10毫升；培養(yǎng)細(xì)胞1×10 8

柱容量：500微克DNA

平均DNA產(chǎn)量：35g/1ml全血處理時(shí)間：1小時(shí)

洗脫體積：0.75~1.5ml

需由用戶提供的材料

吸管和管尖

離心機(jī)：應(yīng)能產(chǎn)生4，000克熱孵化器的力

烘箱(可選)乙醇(96%~100%)渦旋

重要說明：

本系統(tǒng)中提供的緩沖區(qū)包含刺激物。在處理這些緩沖器時(shí)，戴上手套和實(shí)驗(yàn)室外套。

手術(shù)前將熱孵化器預(yù)熱至60°C。

在所有的離心步驟中，使用帶有擺動(dòng)桶轉(zhuǎn)子的離心機(jī)和4，000~6，000克的力。

將500升無菌的ddH2O加入到延長(zhǎng)K管中，制成22毫克/毫升的原液。確定蛋白酶K粉已*溶解。將庫存溶液存放在4°C。

為步驟11(釋放步驟)過熱釋放緩沖器或ddH2O。

血液DNA提取協(xié)議

在開始以下步驟之前，請(qǐng)閱讀重要說明。

將多達(dá)10毫升的樣本(全血、布菲大衣)轉(zhuǎn)移到50毫升離心管(未提供)。

--如果樣品體積小于10mL，則加入PBS使體積達(dá)到10mL。

在樣品中加入500升蛋白酶K(20 mg/ml)，用旋渦法攪拌均勻。在樣品混合物中加入10毫升的光纖光柵緩沖液。通過脈沖旋渦充分混合.

-不要直接將蛋白酶K添加到FABG緩沖液中。

將樣品混合物在60℃下孵育15分鐘，以使樣品分離。在孵化過程中，每3-5分鐘倒置一次.

(可選)：如果需要無RNA的基因組DNA，在樣品混合物中加入80毫升100毫克/毫升的核糖核酸酶A(未提供)，在室溫下孵育10分鐘。

在樣品中加入10 ml乙醇(96~100%)。通過漩渦充分混合。如果出現(xiàn)沉淀物，就用噴入的方法打破它。

將FABG Maxi柱放置在50毫升離心管上(未提供)。并將15毫升的樣品混合物(添加乙醇)(包括任何沉淀物)仔細(xì)轉(zhuǎn)移到FABG Maxi柱。關(guān)上蓋子 4，000~6，000×g離心3 min。

一

英語字母表的第22個(gè)字母 1115

丟棄流道，將剩余的樣品混合物轉(zhuǎn)移到相同的FABG Maxi柱上.關(guān)閉蓋和離心機(jī)在4，000~6，000 x g，3分鐘，并丟棄流過.

8在FABG Maxi柱上加入4ml W1緩沖液(乙醇加乙醇)。關(guān)閉蓋子，在4，000~6，000×g離心3 min。丟棄流道，將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。

-確保乙醇在次打開時(shí)已加入W1緩沖液。

在FABG Maxi柱上加入7毫升的洗滌緩沖液(加入乙醇)。關(guān)閉蓋子，在4，000~6，000×g離心15 min。丟棄流道，將fbg maxi柱放回50毫升。 離心管。

--在次打開時(shí)，確保已將乙醇添加到清洗緩沖液中。

-重要的一步！確保離心后殘余液體被*除去。可能需要在70°C的真空烘箱中繼續(xù)干燥3英里。 lutes[人名] 盧茨

將FABG Maxi柱放入新的50毫升離心管中。(洗脫管，提供)

FABG Maxi柱膜中心加入0.75~1.5ml預(yù)熱洗脫緩沖液或ddH2O(pH7.5-9.0)。將FABG馬溪柱在室溫下放置5 min。

-重要的一步！若要進(jìn)行有效洗脫，需在FABG Maxi柱上放置5分鐘，以確保洗脫緩沖液被柱膜*吸收。

-標(biāo)準(zhǔn)體積為0.75~1.5ml。如果需要更高的DNA產(chǎn)量，重復(fù)DNA排出步驟(步驟11)，以提高DNA恢復(fù)。

4，000×g離心2分鐘，以逃避總DNA。

程序：(用于培養(yǎng)細(xì)胞DNA的提取)

將多達(dá)1x108個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到50毫升離心管(未提供)。4，000~6，000 x g離心5 min，使細(xì)胞顆粒化。(如果使用貼壁細(xì)胞，則在Harv之前將細(xì)胞胰蛋白酶化。 besting1。[口]打敗，勝過( best的現(xiàn)在分詞 )

用10毫升PBS刺激細(xì)胞。

從第4步開始遵循血液協(xié)議。

發(fā)現(xiàn)并修理故障，解決紛爭(zhēng)

基因組DNA提取血液DNA Mini / Midi / Maxi試劑盒

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